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破解分析困局:能耐100%純水與pH 0.5的C18液相色譜柱真的存在嗎?

破解分析困局:能耐100%純水與pH 0.5的C18液相色譜柱真的存在嗎?

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在液相色譜分析的世界里,C18色譜柱無疑是當(dāng)之無愧的“功勛柱”。超過80%的反相分離任務(wù)都由它承擔(dān)。然而,即使是這位“老將”,也面臨著兩大長期困擾分析工作者的技術(shù)痛點(diǎn):一是對(duì)100%純水流動(dòng)相的耐受性差,導(dǎo)致強(qiáng)極性化合物保留弱、分離失??;二是對(duì)極端pH,尤其是低pH的穩(wěn)定性不足,色譜柱壽命短,方法重現(xiàn)性難以保障。

因此,當(dāng)有人提出“是否存在一款既能耐100%純水,又能耐pH低至0.5的C18液相色譜柱?”時(shí),許多分析師的第一反應(yīng)或許是懷疑。這聽起來像是一個(gè)遙不可及的理想化目標(biāo),是對(duì)傳統(tǒng)C18技術(shù)極限的挑戰(zhàn)。

今天,我們可以肯定地回答:這不僅存在,而且恒譜生C18-AR(osd)色譜柱已經(jīng)將其變?yōu)楝F(xiàn)實(shí),并正以其卓越的性能,為眾多領(lǐng)域的分析工作帶來革命性的改變。

一、 傳統(tǒng)C18的“阿喀琉斯之踵”:為何水相與低pH成為難題?

要理解C18-AR的革命性,我們首先要看清傳統(tǒng)C18色譜柱的局限所在。

“疏水塌陷”與100%水相難題:傳統(tǒng)C18鏈在高比例水相環(huán)境下,會(huì)因疏水作用而相互聚集、折疊,緊緊貼附在硅膠表面,這一現(xiàn)象被稱為“疏水塌陷”。一旦塌陷,C18鏈的有效作用表面積急劇減小,對(duì)化合物的保留能力顯著下降,特別是強(qiáng)極性物質(zhì)幾乎無法保留,直接隨死體積流出,導(dǎo)致分析失效。雖然部分封尾技術(shù)能稍作改善,但無法從根本上解決100%純水條件下的塌陷問題。

“硅氧鍵斷裂”與低pH穩(wěn)定性危機(jī):硅膠基質(zhì)在低pH(通常<2.0)環(huán)境下非常脆弱。水相中的氫離子會(huì)催化硅膠骨架上的硅氧鍵(Si-O-Si)水解斷裂,尤其是在鍵合C18鏈的鍵合相界面處。這個(gè)過程一旦開始,就如同大壩出現(xiàn)管涌,鍵合相會(huì)逐漸流失,柱效不可逆轉(zhuǎn)地下降,柱壽命大幅縮短。常規(guī)C18柱通常建議在pH 2.0-8.0范圍內(nèi)使用,正是為了規(guī)避這一風(fēng)險(xiǎn)。

正是這兩大難題,限制了分析方法開發(fā)者的手腳,迫使他們?cè)诿鎸?duì)強(qiáng)極性化合物或需要使用強(qiáng)酸流動(dòng)相時(shí),不得不尋求其他昂貴或復(fù)雜的替代方案。

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二、 恒譜生C18-AR 色譜柱

恒譜生C18-AR色譜柱之所以能突破上述局限,并非偶然,而是其背后精心設(shè)計(jì)的創(chuàng)新技術(shù)共同作用的結(jié)果。

核心技術(shù)一:獨(dú)特的側(cè)鏈位阻保護(hù)鍵合工藝

這是C18-AR能夠耐受pH低至0.5的關(guān)鍵。這項(xiàng)技術(shù)并非簡單的C18鏈鍵合,而是在鍵合過程中,通過引入具有空間位阻效應(yīng)的特殊側(cè)鏈基團(tuán),如同為脆弱的硅氧鍵鍵合點(diǎn)撐起了一把“保護(hù)傘”。這把“傘”有效地阻隔了水相中高濃度氫離子對(duì)鍵合相的進(jìn)攻,極大地延緩了水解過程。這使得C18-AR能夠在傳統(tǒng)C18柱望而卻步的強(qiáng)酸環(huán)境中(如0.1% TFA,甚至更高濃度的磷酸、三氟乙酸體系)長期穩(wěn)定運(yùn)行,為肽類分離、某些堿性化合物分析等必須使用低pH流動(dòng)相的應(yīng)用提供了堅(jiān)實(shí)保障。

核心技術(shù)二:未封尾設(shè)計(jì)與卓越的水相兼容性

C18-AR選擇了未封尾的設(shè)計(jì)。這與常規(guī)認(rèn)知中“封尾能改善峰形”的理念似乎相悖,但正是這一設(shè)計(jì)的精髓所在。未封尾意味著硅膠表面殘留的硅羥基(Si-OH)未被短鏈烷基完全覆蓋。這些裸露的硅羥基在100%水相環(huán)境中,能夠通過親水作用和水合效應(yīng),在硅膠表面形成一層穩(wěn)定的水合層。這層“水膜”有效地阻止了C18長鏈的疏水塌陷。

同時(shí),未封尾的設(shè)計(jì)帶來了另一大驚喜:它為分離選擇性提供了額外的維度。殘留的硅羥基可以與分析物發(fā)生微弱的離子交換或氫鍵相互作用,這種二次相互作用對(duì)于分離結(jié)構(gòu)極其相似的異構(gòu)體(如位置異構(gòu)體、順反異構(gòu)體)具有獨(dú)特的效果,往往能實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)封尾C18柱無法達(dá)到的分離度。

核心技術(shù)三:精益求精的基質(zhì)與工藝保障

任何卓越的鍵合技術(shù)都離不開一個(gè)高品質(zhì)的舞臺(tái)——硅膠基質(zhì)。恒譜生C18-AR所采用的硅膠填料,具備良好的機(jī)械強(qiáng)度、均勻的孔徑及粒徑分布。這確保了色譜柱在高壓下依然保持穩(wěn)定,并提供了極高的柱效。更重要的是,極佳的批次間穩(wěn)定性意味著您今天開發(fā)的分析方法,在三年后更換新批號(hào)色譜柱時(shí),依然能完美重現(xiàn),這對(duì)于藥品質(zhì)量控制等需要長期驗(yàn)證的領(lǐng)域至關(guān)重要。

三、 性能實(shí)測:參數(shù)說話,見證非凡實(shí)力

讓我們用具體數(shù)據(jù)來描繪這款色譜柱的強(qiáng)悍形象:

pH耐受范圍:0.5 – 8.0.這是一個(gè)足以讓絕大多數(shù)競爭對(duì)手汗顏的寬廣窗口。

水相耐受:完美兼容100%純水 ~ 100%有機(jī)相的任意比例流動(dòng)相,無縫銜接。

碳載量:10%,適中的碳載量在提供足夠保留的同時(shí),確保了傳質(zhì)速率和柱效。

粒徑選擇:提供從1.7μm、1.8μm(適用于UPLC/UHPLC)到3μm、5μm(適用于HPLC)?的全系列選擇,滿足從高效快速到高載樣量的不同需求。

規(guī)格齊全:UPLC常用規(guī)格(如2.1mm內(nèi)徑系列)和HPLC常用規(guī)格(如4.6mm內(nèi)徑系列)一應(yīng)俱全,支持方法在不同平臺(tái)間的無縫轉(zhuǎn)移。

譜圖C18-AR

四、 應(yīng)用場景:賦能前沿分析,解決實(shí)際難題

基于以上特性,恒譜生C18-AR色譜柱在多個(gè)高挑戰(zhàn)性分析領(lǐng)域大放異彩:

藥物降解產(chǎn)物分析:在化藥的強(qiáng)制降解(光照、酸、堿、氧化)研究中,會(huì)產(chǎn)生多種極性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)相似的降解產(chǎn)物。C18-AR的低pH耐受性允許使用高濃度TFA等增強(qiáng)保留和峰形,而其多機(jī)制協(xié)同作用(疏水+離子交換)能有效分離這些難以分辨的雜質(zhì)。

代謝物與生物分子分離:體內(nèi)代謝物、氨基酸、小分子肽通常極性很強(qiáng)。C18-AR的100%水相耐受能力確保了這些物質(zhì)能被充分保留和分離,無需使用離子對(duì)試劑等復(fù)雜手段,簡化了方法開發(fā)。

復(fù)雜異構(gòu)體分辨:無論是維生素異構(gòu)體(如維生素A、D)、手性藥物中間體,還是中藥中復(fù)雜的黃酮、皂苷類成分,C18-AR的未封尾設(shè)計(jì)所提供的獨(dú)特選擇性,能輕松實(shí)現(xiàn)基線分離,得到尖銳對(duì)稱的峰形。

多組分復(fù)雜體系分析:其“一柱多能”的特性,使得它能夠同時(shí)應(yīng)對(duì)復(fù)雜樣品中的酸性、堿性和中性化合物,大大簡化了方法開發(fā)流程,提升了分析效率。

“能耐100%純水,耐pH到0.5的C18(ODS)色譜柱”不再是一個(gè)疑問句,而是恒譜生C18-AR色譜柱為您帶來的確定性答案。它不僅僅是一根色譜柱,更是一位可靠的分析伙伴,以其創(chuàng)新的側(cè)鏈位阻保護(hù)技術(shù)、巧妙的未封尾設(shè)計(jì)和對(duì)基礎(chǔ)材質(zhì)的嚴(yán)苛要求,為您打破了傳統(tǒng)反相色譜的應(yīng)用枷鎖。

當(dāng)您下一次面對(duì)強(qiáng)極性物質(zhì)保留不足、低pH條件柱壽命堪憂、或者棘手異構(gòu)體難以分離的困境時(shí),請(qǐng)想起這位“破局者”。選擇恒譜生C18-AR色譜柱,讓我們攜手,將您分析實(shí)驗(yàn)室中的“不可能”變?yōu)椤俺R?guī)操作”。


發(fā)布于: 2025-11-13
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