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保持液相色譜柱柱溫有助于準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性
??????? 溫度的變化會(huì)對(duì)色譜分析方法的重現(xiàn)性和色譜柱的壽命產(chǎn)生重大影響。但為什么會(huì)這樣？恒譜生在以下的內(nèi)容將會(huì)為您介紹。 ??????? 一、再現(xiàn)性 ??????? 隨著溫度的變化，液相色譜柱內(nèi)固定相和流動(dòng)相之間的熱力學(xué)會(huì)受到直接影響。在不同溫度下運(yùn)行方法可能會(huì)影響分析物容量因子 (k) 或分析物在色譜柱上的保留時(shí)間。 ?...Read more -
HPLC溶劑進(jìn)樣口過(guò)濾器過(guò)濾流動(dòng)相的重要性
? ??????? 緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿（或弱堿及其共軛酸）的水溶液。加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿后，緩沖溶液的 pH 值變化很小，當(dāng)小的環(huán)境因素發(fā)生變化時(shí)，有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將 pH 值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸 (HA) 與其共軛堿之間存在平衡，它們對(duì) pH 變化具有抵抗力。 ??????? 一、...Read more -
高效液相色譜儀器組成
??????? HPLC 色譜儀器可以是一組單獨(dú)的模塊或元件，但也可以設(shè)計(jì)為單個(gè)裝置。模塊概念在單個(gè)組件失效的情況下更加靈活；此外，系統(tǒng)各個(gè)零件不必來(lái)自同一制造商。如果您不喜歡自己進(jìn)行小修，您會(huì)更喜歡緊湊型儀器。然而，這并不需要比模塊化套件更少的工作臺(tái)空間。 ??????? 一臺(tái) HPLC 儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸...Read more -
深入了解液相色譜柱小型化
??????? 雖然質(zhì)譜聯(lián)用液相色譜已被證明是發(fā)現(xiàn)組學(xué)（蛋白質(zhì)組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、食物組學(xué)和糖組學(xué)）領(lǐng)域的強(qiáng)大工具。組學(xué)研究經(jīng)常受到樣本復(fù)雜性的挑戰(zhàn)。在處理少量樣品、小體積和復(fù)雜的樣品基質(zhì)（生物流體和單細(xì)胞分析）時(shí)，對(duì)感興趣的分子進(jìn)行識(shí)別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰(zhàn)。減小色...Read more -
HPLC 基礎(chǔ)知識(shí)——所有關(guān)于液相色譜的基礎(chǔ)知識(shí)
??????? 液相色譜作為最常用的色譜被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、食品分析等領(lǐng)域，hplc的種類有哪些？恒譜生帶你了解！ ??????? 一、液相色譜的種類 1、吸附色譜 以硅膠或氧化鋁為固定相。分子與硅膠之間的弱相互作用鍵稱為吸附，鍵的溶解解吸。由于洗脫液分子先于樣品分子占據(jù)硅膠的活性位點(diǎn)，因此樣品分子只有在與活性位點(diǎn)...Read more -
C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理
??????? 將C18 固定相稱為用的最多的化學(xué)物質(zhì)之一可能更合適。在色譜柱供應(yīng)商中，這一階段的不斷增長(zhǎng)的品種肯定不少。然而，在我們深入研究手頭的主題之前，這里簡(jiǎn)要回顧一下 C18 固定相是如何產(chǎn)生的。 ??????? 一、反相色譜 ??????? 隨著更多科學(xué)家參與反相色譜該領(lǐng)域，色譜中引入了額外的分離模式，以分離和純化許多不...Read more -
高效液相色譜及其部件介紹
??????? 高效液相色譜(HPLC) 是一種流行且用途廣泛的技術(shù)，可為復(fù)雜有機(jī)樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的解決方案。了解各個(gè)組成部分以及每個(gè)組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。 ??????? 一、高效液相色譜及其部件介紹 系統(tǒng)主要組成部分為： 泵 探測(cè)器 根據(jù)應(yīng)用產(chǎn)生無(wú)限數(shù)量的其他配置。比如流動(dòng)...Read more -
色譜分析里的柱層析
??????? 柱層析被描述為一種有用的技術(shù)，其中待分離的物質(zhì)被置于裝有吸附劑（固定相）的柱子的最高點(diǎn)上，以不同的速率通過(guò)柱子，這取決于每種物質(zhì)對(duì)吸附劑的親和力。吸附劑和溶劑或溶劑混合物，并且通常在不同時(shí)間從柱中通過(guò)時(shí)聚集在溶液中。 ??????? 兩種最常見的柱色譜固定相是硅膠和氧化鋁，而有機(jī)溶劑被認(rèn)為是最常見...Read more -
HPLC保護(hù)柱的使用原理
??????? HPLC 色譜柱是液相色譜的重要組件，因?yàn)樗秦?fù)責(zé)分離基質(zhì)中分析物的色譜柱。保護(hù)和保養(yǎng)色譜柱可確保我們不僅獲得可靠的結(jié)果，還能無(wú)故障操作。我們都知道 HPLC 色譜柱的使用壽命是有限的，但是如何確保獲得最長(zhǎng)的使用壽命呢？ 要回答這個(gè)問(wèn)題，讓我們首先看看色譜柱可能被阻塞的原因。 ??????? 一、引入 HPLC 色...Read more -
使用制備液相色譜的工作流程和技巧
??????? 本文的重點(diǎn)是快速液相色譜和高效液相色譜。沒(méi)有一種完美的協(xié)議適合每一種分離目的。因此，建議為您的特定應(yīng)用程序優(yōu)化方法。通過(guò)本文中列出的建議以及一些前期閱讀和測(cè)試，您將輕松純化您正在尋找的組件。 ??????? 一、快速液相色譜純化 ??????? 使用快速色譜法進(jìn)行純化的缺點(diǎn)是該方法固有的分辨率較低?？焖僖?..Read more -
hplc液相色譜系統(tǒng)準(zhǔn)備緩沖液的技巧
???????? 液相色譜是世界各地實(shí)驗(yàn)室使用的流行純化技術(shù)。如果系統(tǒng)設(shè)置和操作正確，它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。學(xué)習(xí)如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統(tǒng)性能的重要技巧之一。準(zhǔn)確制備和正確選擇緩沖液對(duì)于在液相色譜中獲得可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。 ????????? 一、了解您的化合物 ????????? 如果您正在尋...Read more -
質(zhì)譜和液相色譜
??????? 質(zhì)譜 (MS) 使研究人員能夠研究許多特性，例如樣品的分子量、結(jié)構(gòu)、特性、數(shù)量和純度。當(dāng)與液相色譜技術(shù)相結(jié)合能成為一種強(qiáng)大的分析工具，能夠從復(fù)雜的生物混合物（如牛奶、血清和全脂）中提取有關(guān)一系列化合物的有意義的數(shù)據(jù)，包括藥物代謝物、肽和蛋白質(zhì)-細(xì)胞裂解物。 ??????? 一、液相色譜與質(zhì)譜 ??????? 在將...Read more -
選擇還是不選擇UHPLC
??????? UHPLC是一種專門的色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過(guò)使用填充較小顆粒（通常直徑小于 2 μm）的較小色譜柱來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無(wú)論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代...Read more -
HPLC 色譜柱挑選指南
??????? 一、分離模式 ??????? 選擇色譜柱的首要任務(wù)是選擇分離模式。分離分子的方法有很多，其中應(yīng)用最廣泛的包括反相、正相、親水相互作用、離子交換和尺寸排阻 HPLC。還有一些不太常見但更專業(yè)的分離模式，例如使用手性固定相或流動(dòng)相的特定手性色譜。 ??????? 反相色譜柱通常用于非極性或弱極性有機(jī)化合物，它包含非...Read more -
維護(hù)液相色譜柱良好狀態(tài)指南
??????? 將色譜柱保持在最佳狀態(tài)將大大有助于改進(jìn)和標(biāo)準(zhǔn)化您的分離操作，同時(shí)確保色譜柱的使用壽命。您可以采取以下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。 ??????? 一、注意清潔。如果您從一開始就注意并定期清潔，那么色譜柱 的使用壽命會(huì)更長(zhǎng)。清潔色譜柱所需的溶劑、酸或堿的類型取決于它們的設(shè)計(jì)和吸附劑的具體類型。雖然有些色譜柱...Read more -
超高效液相色譜—UHPLC改進(jìn)大蛋白質(zhì)分子的分離度
??????? 首次將 UHPLC 用于小分子分離時(shí)，能得到很好的峰形，但是蛋白質(zhì)峰的分離幾乎沒(méi)有那么好，因此通常不可能顯著縮短運(yùn)行時(shí)間。然而，最近對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)一步改進(jìn)讓UHPLC 可以提供更好的分離度和更短的運(yùn)行時(shí)間。雖然 UHPLC 不能讓科學(xué)家始終看到蛋白質(zhì)之間的所有差異，但它可以讓他們看到一些差異——例如，在大體形態(tài)、...Read more -
如何選擇HPLC還是UHPLC？
??????? UHPLC是一種專門的液相色譜方法，與 HPLC 相比，它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過(guò)使用填充較小顆粒（通常直徑小于 2 μm）的較小色譜柱來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無(wú)論這些分子是蛋白質(zhì)、肽...Read more -
如何保證HPLC 色譜柱有效工作？
??????? 引入 HPLC 色譜柱的樣品通常多種多樣且復(fù)雜，這些樣品可能含有許多與 HPLC 條件不兼容的成分。在沒(méi)有適當(dāng)?shù)臉悠分苽浠驑悠奉A(yù)處理的情況下注入此類樣品可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞。比如殘留的蛋白質(zhì)和高疏水性化合物（如脂質(zhì)）在反相分離過(guò)程中也可能不會(huì)完全洗脫出來(lái)，它們往往會(huì)慢慢吸附到色譜柱上并引起問(wèn)題。 ? ??...Read more -
高效液相色譜故障排除
??????? 泄漏是 HPLC 分析中的常見問(wèn)題。為了最大限度地減少系統(tǒng)中的泄漏，請(qǐng)盡量選擇相同制造商的硬件。如果安裝不兼容的接頭，分離過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，重復(fù)連接可能最終導(dǎo)致接頭泄漏。如果需要更換，請(qǐng)使用適當(dāng)?shù)倪m配器并在實(shí)驗(yàn)之前檢查所有連接是否泄漏。 ??????? 色譜柱篩板堵塞是另一個(gè)常見的 HPLC 故障問(wèn)題，想...Read more -
如何生成真實(shí)的液相色譜分析結(jié)果？
? ???????? 作為一名液相色譜工作者，您最關(guān)心的還是生成真實(shí)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)可以在任何其他實(shí)驗(yàn)室的相同條件下被普遍接受和重現(xiàn)。如果忽視全球公認(rèn)的規(guī)范，即使使用最復(fù)雜的工具也無(wú)法達(dá)到目的。系統(tǒng)適用性是在化學(xué)分析中生成有效數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。 ??????? 液相色譜法，是從事制藥、食品、法醫(yī)學(xué)、聚合物、生命科學(xué)和環(huán)...Read more -
如何生成可靠的液相色譜 HPLC 結(jié)果？
???????? 液相色譜HPLC 在分析研究和質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室中占有重要地位。與制造過(guò)程和研究結(jié)果發(fā)表有關(guān)的重要決定是基于 HPLC 系統(tǒng)生成的數(shù)據(jù)具有高度可靠性的情況下才能做出的決定。因?yàn)镠PLC 是一個(gè)多組分系統(tǒng)，因此分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性取決于每個(gè)組分的性能水平。恒譜生本文介紹了一些有助于提高結(jié)果真實(shí)性的建議。 ?...Read more -
高通量液相色譜中進(jìn)樣的注意事項(xiàng)
??????? 近年來(lái)，為減少分析時(shí)間和提高分析通量而誕生的超高效液相色譜技術(shù)取得了令人矚目的發(fā)展。超高效液相色譜儀器能夠承受更高系統(tǒng)壓力和流速，并且分析速度和效率大大提升；檢測(cè)器模塊的改進(jìn)和新的數(shù)據(jù)處理算法也有效提升信號(hào)采集的速率；現(xiàn)代色譜柱技術(shù)的發(fā)展，即使是很短的柱長(zhǎng)也能提供足夠高效色譜分離效率，比...Read more -
如何維護(hù)超高效液相色譜柱？
??????? 使用高效液相色譜 (HPLC) 來(lái)分析樣品被廣泛應(yīng)用于藥物組分分析、食品添加劑測(cè)定和環(huán)境樣品測(cè)試等。由于液相色譜柱是許多實(shí)驗(yàn)室的核心設(shè)備且成本高昂，因此保護(hù)柱子免受損壞是延長(zhǎng)色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護(hù)良好的色譜柱還能產(chǎn)生一致且準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，為可靠的分析結(jié)果提供支持。 ??????? 如何提高色...Read more -
HPLC、UHPLC 樣品制備時(shí)該注意些什么？
? ??????? 樣品過(guò)濾是制備色譜分析樣品的關(guān)鍵步驟。實(shí)驗(yàn)前如果不過(guò)濾樣品會(huì)導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞等問(wèn)題，從而導(dǎo)致背壓增高和色譜柱性能下降。最終，這會(huì)增加花在色譜儀故障排除和維護(hù)上的時(shí)間，浪費(fèi)時(shí)間也增加科研人員的工作量。 ??????? 對(duì)于大多數(shù)類型的樣品，過(guò)濾處理相對(duì)比較簡(jiǎn)單。在進(jìn)樣前用溶劑進(jìn)樣口過(guò)濾器對(duì)流動(dòng)相...Read more
